Lyhyt katsaus alkalisen fosfataasimäärityspakkaukseen (Alp)

Tärkeä osa hyvää laboratoriota ovat erilaiset näytteiden valmisteluvälineet ja tuotteet. Yleisimmät näytteenvalmistusvälineet ovat liemisekoittimet, piidioksidielektroforeesi/röntgendiffuusi, lasiastiat, happopohjaiset viljelymaljat ja mikrolevyt, kuopat ja viljelyrummut. Kaikki nämä tuotteet mahdollistavat lähes kaikentyyppisten näytteiden analysoinnin ja arvioinnin. Tämäntyyppiset tuotteet on kuitenkin suunniteltu tiettyyn käyttötarkoitukseen, minkä vuoksi on vaikeaa yleistää eri tuotteiden hyödyllisyyttä eri tarkoituksiin. Tässä on hyödyllinen luotettava alkalinen fosfataasi ihmisen seerumissa in vitro -pakkaus.

Luotettavaa alkalista fosfataasia ihmisen seerumissa in vitro voidaan käyttää määrittämään näytteen happaman tuhkan retentio, kolorimetria ja vapaus. Heti kun näytteet sekoitetaan elatusaineeseen, ne käyvät läpi useita erilaisia ​​prosesseja. Ensin viljelyväliaine sekoitetaan näytepuskurin kanssa. Tämä yhdistelmä antaa näytteille mahdollisuuden kokea useita muuttujia, joista puskuri on tärkeä osa. Näin tutkijat voivat arvioida eri alkuaineiden pitoisuuksia näytteissä eri aikoina.

Tärkeä osa puskuria on pH-indikaattori. Tämä havaitsee näytteen happamuuden substraatin pitoisuuden määrittämiseksi. Sitten seuraava vaihe on näytteiden huuhtelu mahdollisten pintajäämien, kuten proteiinin tai DNA:n, poistamiseksi. Seuraavaksi näytteet inkuboidaan vaihtelevien määrien kanssa alfahydroksiasetonia ja asetetaan sitten alkaliseen fosfaattiin liuotettuun viljelyalustaan, joka sisältää useita erilaisia ​​biologisia koettimia, joihin on lisätty alkalista fosfataasia.

Sarja sisältää huuhteluharjan ja mikropropulsiopumpun. Sarja käyttää mikrokiteistä hiivaa kasvualustana. Näytteitä voidaan kasvattaa vedellä täytetyssä petrimaljassa tai magneettilevyillä, joissa näyte huuhdellaan tislatulla vedellä. Jäädytettyä ihmisen seerumia tai jäädytettyä eläimen seerumia voidaan käyttää myös viljelyväliaineen korvaamiseen alkaliseen fosfaattiin liuotetussa entsyymisarjassa alp-aktiivisuuden mittaamiseksi in vitro.

Tämän tyyppisen sarjan käyttämisessä on useita etuja. Ensinnäkin tämä menetelmä on herkkä substraattipitoisuuden muutoksille, joten se voi havaita kaikki muutokset substraattitasoissa niin kauan kuin näyte pysyy suspensiossa. Tämän ansiosta tutkijat voivat mitata alppikinetiikkaa, substraatin hapettumista ja muita biokemiallisia prosesseja. Myös entsyymimäärityksessä käytetyt seeruminäytteet ja elatusaine voidaan tarvittaessa vaihtaa.

Sarjan laboratorioreagenssit sisältävät vakiokäyräreagenssit ja pH-indikaattorit. Saatavilla on myös räätälöity aloituspakkaus. Räätälöity aloituspakkaus sisältää ihmisen plasmanäytteitä neljältä eri henkilöltä. Verenpaine, pulssi ja lämpötila mitataan osana standardikäyräanalyysiä jokaisen henkilön mukaan.

Sarjan pH-indikaattori on digitaalinen anturi, jota voidaan käyttää ihmisen seerumin tai jäädytettyjen näytteiden happamuuden tai alkaliteetin määrittämiseen. pH-indikaattori ja mikrokiteinen hiivasuspensio yhdistetään testireagenssien kanssa. Kolmen komponentin sekoittamisen jälkeen näytteitä inkuboidaan kaksi tuntia 37 °C:ssa. Sitten näytteet ajetaan standardikäyrän reagenssien lineaarisella pitoisuusalueella näytetiheyden ja alkalisen fosfaattiamiinin pitoisuuden määrittämiseksi. Mikrokiteinen hiiva ajetaan sitten lineaarisella substraattiamiinin konsentraatioalueella alkalisen fosfaattiamiinin pitoisuusmäärityksissä substraattipitoisuuden ja alkalisen fosfaattiamiinin tiheyden määrittämiseksi näytteissä.

Sarja sisältää käyttöoppaan, jossa on täydelliset ohjeet sarjan käytöstä ja menettelystä testeissä tarvittavien reagenssien laskemiseksi. Sarjaa voidaan käyttää joko yksittäisiin tai useisiin määrityksiin. Käytetyt reagenssit ovat lateksipohjaisia ​​eivätkä reagoi haitallisesti minkään suun kautta otettavan lääkkeen kanssa. Näytteistä on mahdollista havaita 10-250 u alppia. Lisätietoja testausmenettelyistä ja näytteenottomenettelyistä on saatavilla pyynnöstä valmistajien verkkosivuilta.