ADA Principle of Adenosine Deaminase Assay Kit (glutamaattidehydrogenaasimenetelmä)

Nykyaikaisen lääketieteellisen diagnoosin alalla biokemiallisten indikaattoreiden mittauksella on keskeinen rooli sairauksien diagnosoinnissa, hoidossa ja ennusteen arvioinnissa. Heidän joukossaan adenosiinideaminaasi (ADA), tärkeänä entsyymimarkkerina, sillä on välttämätön rooli eri sairauksien diagnosoinnissa. ADA mitataan yleensä käyttämällä erityistä sarjaa. Tässä esittelemme yksityiskohtaisesti ADA Adenosine Deaminase Assay Kitin periaatteen, joka perustuu glutamaattidehydrogenaasimenetelmään.

1. ADA:n fysiologinen merkitys
ADA on entsyymi, jota esiintyy laajalti ihmiskehon eri kudoksissa, erityisesti lymfosyyteissä. Se osallistuu pääasiassa adenosiinin aineenvaihduntaprosessiin muuttaen adenosiinin inosiiniksi ja ammoniakiksi. Normaaleissa fysiologisissa olosuhteissa ADA-aktiivisuus pysyy suhteellisen vakaalla tasolla. Kuitenkin, kun tiettyjä sairauksia esiintyy ihmiskehossa, ADA:n toiminta muuttuu. Esimerkiksi sellaisissa sairauksissa kuin tuberkuloottinen keuhkopussintulehdus, hepatiitti ja kirroosi ADA:n aktiivisuus lisääntyy merkittävästi.

2. ADA-määrityssarjan periaate
ADA-määrityssarjan (glutamiinihappodehydrogenaasimenetelmä) periaate perustuu siihen, että ADA katalysoi adenosiinin deaminaatiota inosiinin ja ammoniakin muodostamiseksi ja sitten glutamaattidehydrogenaasin avulla ammoniakin muuttamiseksi glutamaatiksi tuottaen samanaikaisesti NADH:ta. NADH:lla on ominaisabsorbanssi aallonpituudella 340 nm. Absorbanssin muutosta mittaamalla voidaan epäsuorasti laskea ADA:n aktiivisuus.
Erityisesti pakkaus sisältää reaktiosubstraattia adenosiinia, koentsyymi NADH:ta, glutamaattidehydrogenaasia ja muita tarpeellisia reagensseja. Reaktion aikana ADA katalysoi adenosiinin deaminaatiota muodostaen ammoniakkia, joka reagoi α-ketoglutaraatin kanssa glutamaattidehydrogenaasin vaikutuksesta muodostaen glutamaattia samalla, kun se kuluttaa NADH:ta. ADA:n aktiivisuus voidaan laskea mittaamalla NADH:n absorbanssimuutos ennen ja jälkeen reaktion.

ADA-määrityssarja (glutamiinihappodehydrogenaasimenetelmä) on herkkä, tarkka ja kätevä ADA-määritysmenetelmä. Se perustuu periaatteeseen, että ADA katalysoi adenosiinin deaminaatiota ammoniakin muodostamiseksi ja laskee ADA:n aktiivisuuden mittaamalla NADH:n absorbanssin muutosta. Tällä sarjalla on laajat sovellusmahdollisuudet kliinisessä lääketieteessä, ja sillä on suuri merkitys sairauksien diagnostisen tarkkuuden parantamisessa, hoidon ohjaamisessa ja ennusteen arvioinnissa.